产品货号:
JN3018
中文名称:
糖苷内切酶H
英文名称:
BalbEndo H
产品规格:
10KU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BalbEndo H是一种重组无标签糖苷酶,能够专一切割β-1,4-糖苷键连接的高甘露糖型结构和某些杂合型糖蛋白,形成带有一个N-乙酰葡萄糖胺的糖蛋白结构。切割后的蛋白仍具有生物活性,不影响其功能等的后续研究。本制品克隆自褶皱链霉菌(streptomyces plicatus)并在E.coli中重组表达,经多步纯化获得。
在10μL的反应体系中,37℃条件下,1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量定义为一个单位。
保存温度:-20℃。
20mM Tris,50mM NaCl,5mM EDTA,pH7.5。
无外切糖苷酶污染,无蛋白水解活性。
将1×Glycoprotein Denaturation Buffer(0.5%SDS,40mM DTT)中100℃煮沸10分钟使其变性,然后在1×Endo H Reaction Buffer(50mM柠檬酸钠pH5.5,25℃)中于37℃温育,进行酶切反应。
第一步:
第二步:
相关搜索:糖苷内切酶H,Endo H,BalbEndo H
- 去除糖蛋白的N-连接高甘露糖。
- 仅切割高甘露糖型结构(n=2-150,x=(Man)1-2,y=H)和杂合型结构(n=2,x和/或y=AcNeu-Gal-GlcNAc)。
在10μL的反应体系中,37℃条件下,1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量定义为一个单位。
组分 | 规格 |
BalbEndo H(500U/μL) | 20μL |
10×Glycoprotein Denaturation Buffer | 1mL |
10×Endo H Reaction Buffer | 1mL |
保存温度:-20℃。
20mM Tris,50mM NaCl,5mM EDTA,pH7.5。
无外切糖苷酶污染,无蛋白水解活性。
- 酶活性不受SDS影响。
- 要使天然糖蛋白去糖基化,可尝试增加酶量,延长温育时间。
将1×Glycoprotein Denaturation Buffer(0.5%SDS,40mM DTT)中100℃煮沸10分钟使其变性,然后在1×Endo H Reaction Buffer(50mM柠檬酸钠pH5.5,25℃)中于37℃温育,进行酶切反应。
第一步:
成分 | 用量 |
10×Glycoprotein Denaturation Buffer | 1μL |
底物 | 10μg |
ddH2O | 至10μL |
100℃,反应10min |
第二步:
成分 | 用量 |
10×Endo H Reaction Buffer | 2μL |
第一步反应液 | 10μL |
BalbEndo H(500U/μl) | 1μL |
ddH2O | 至20μL |
37℃,60min |
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